スライム

Scientific Reports volume 12、記事番号: 21768 (2022) この記事を引用

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メトリクスの詳細

ナメクジ Arion vulgaris は、ヨーロッパで最悪の侵入性草食害虫の 1 つとして大きな注目を集めており、移動のために分泌する硬い粘液で有名です。 この研究では、アリオン分泌物からの細胞外小胞、特にエキソソームおよびエクソソーム様小胞の単離と特性評価に焦点を当てました。 我々は、ナメクジ粘液を収集し、その後超遠心分離によって小胞を分離する方法を開発しました。 平均直径約 100 nm の単離された小胞には、哺乳動物のガレクチンに似た接着分子だけでなく、豊富なタンパク質と短い RNA が含まれています。 我々は、ナメクジの細胞外小胞が植物細胞やヒトのがん細胞に取り込まれ、生理活性化合物をロードできることをin vitroアッセイで実証した。このため、ナメクジはバイオテクノロジーで利用するための興味深いツールとなる。

スペインナメクジ (Arion vulgaris、Moquin-Tandon、1855 年) は、ヨーロッパで最も一般的な腹足動物の種で、ヨーロッパで最悪の侵入害虫の一つに挙げられています。 アリオンナメクジは貪欲な草食動物であり、重大な生態系 1,2,3,4,5 と経済的損害 6,7 を引き起こすことが知られています。 さらに、それらは病原性細菌の媒介者として、またペットや牛に害を及ぼす寄生虫の宿主として機能します8、9、10。 アリオン尋常性菌は、主に上皮下の側方および腹側に位置する 5 つの腺タイプによって生成される、非常に粘性が高く、粘着性で除去が難しい腹粘液を生成します。これにより、地理的分散の成功に寄与する可能性がある、さまざまな種類の表面や自然および人工の障害物を克服することができます。そしてヨーロッパ全土における現在の蔓延のレベル11、12、13。

この研究では、アリオン粘液中の細胞外小胞、特にエキソソームおよびエクソソーム様小胞 (EX) を検索することにしました。 EX は、ほとんどの真核細胞のエンドソーム コンパートメントで生成される平均直径約 100 nm の細胞外小胞であり、生物医学への応用において大きな可能性を秘めています (14、15 で徹底的にレビューされているように)。 例えば、ストレプトマイセス種から単離されたドキソルビシン（DOX、アドリアマイシン）。 さまざまな固形悪性腫瘍の第一選択療法として頻繁に使用されるこの薬（1974年にFDAによって承認）は、用量依存性の心臓毒性および重篤な全身毒性で知られており、ヒトの体外細胞由来のエキソソームとの結合により大幅に軽減される可能性があります。文化16．

研究や最近の治療において哺乳類が伝統的なEXの供給源であることに次いで、最近では非哺乳類のEXの供給源が、その興味深い特性と複雑な役割（種間の相互作用から王国間のコミュニケーションに至るまで）により人気を集めている17,18。 19、20、21、22。 ミツバチ製品、ヘビ毒、植物や果物などの多様な供給源からの有害物質は、農業、製薬、生物医学産業にとってますます魅力的なツールボックスになりつつあります17、20、23、24。 この研究分野の進歩（そして潜在的に大規模なEX分離にアリオンナメクジが利用可能であること）に触発されて、我々はバイオテクノロジー応用のための潜在的なEXの代替供給源として有害なアリオン尋常性を検査することに着手した。

この研究では、ナメクジ粘液の収集とその後の超遠心分離による EX の分離のためのシンプルで効率的な方法を提供しました。 スラグ EX は、動的光散乱技術によって提供されるサイズ分布プロファイルとともに、ナノ粒子サイズ分析と透過型電子顕微鏡によって特徴付けられ、視覚化されました。 EXs タンパク質含有量はビシンコニン酸および CBQCA タンパク質定量アッセイによって定量され、RNA 単離が実行され、ウェスタンブロッティングを使用して接着分子の存在が確認されました。 さらに、インビトロ条件での細胞取り込みとともにナメクジ EX のモデル薬物ローディング効果が実証されました。